母种→原种
购买试管母种时，要注意鉴别母种的优劣，仔细检查试管中菌丝的生长情况，以免买到老化的母种。一般来说，健壮的母种表现为菌丝洁白、粗壮、尖端整齐。若菌丝干散或培养基收缩，瓶底有黄色积水，说明菌丝已老化，请勿购买。
从母种到原种，是菌种第一次扩大培养的过程。具体方法：
材料准备：试管母种、啤酒瓶（按照1个试管母种接种12个啤酒瓶的用量准备）；玉米粒或麦粒（按照1个啤酒瓶盛250～300克玉米粒或麦粒的用量准备）等。
操作过程：先处理培养料，若选用麦粒，需将其用水浸泡24小时（中间换3次水，以防酸化）；若选用玉米粒，因其种皮较厚，不易泡透，需将其煮熟后使用。注意，煮玉米粒时要把握好火候，既不能让玉米粒“开花”，也不能外熟内生。
当啤酒瓶内装入培养料的量为瓶的4/5时，用棉塞封口，外用牛皮纸包裹，以防高温灭菌时蒸汽浸湿棉塞。而后将瓶子摆放到蒸锅上高温灭菌12小时左右。
灭菌完毕后，待瓶温降至30℃，再将其转移至无菌接种箱内进行接种，即用接种针从母种试管内挑起少许菌丝，快速放入啤酒瓶内，用棉塞封口，外用牛皮纸包裹。然后，把接种好的啤酒瓶放在温度约25℃的室内保存，以促发菌丝生长。一般经过20～25天即可得到原种。
提醒：好的原种菌丝密集、洁白、长势均匀、粗壮，呈棉毛状，且有爬壁现象。原种长满瓶后，需立即扩大繁殖为栽培种，否则一旦营养耗尽，菌丝就会衰老，甚至死亡。
原种→一级栽培种
原种扩大繁殖便为栽培种。但是由于原种数量较少，若直接转移至菌袋内进行出菇生产，不仅因菌种少、菌势弱而导致发菌期延长，还会因菌袋两头的生长速度不一致而导致出菇不均匀。故建议菇农采取先小袋后大袋的制种模式，即先将原种接种到小菌袋内进行小袋制种，而后再转接至大菌袋内进行正式栽培，这样一来就能保证有足够的发菌速度和整齐度，且菌势强，感染杂菌的几率小。
材料准备：一级棉子壳（加水湿润，直至手握时指缝有水而不下滴为宜，加入适量的石灰调节酸碱度，搅拌均匀即可）；小菌袋（规格18厘米×40厘米×0.03厘米或22厘米×45厘米×0.04厘米的聚乙烯塑料袋，用量按照1个啤酒瓶分装10个小菌袋准备）等。
操作过程：先把事先备好的培养料棉子壳装入小菌袋中，两头扎紧，然后置于蒸锅上高温灭菌，当温度达到100℃时持续20小时。灭菌完毕后，将其置于通风阴凉处降温，当温度在30℃以下时即可接种。为了便于接种，可用接种匙把啤酒瓶内的原种全部倒在小盆内，或先用胶带在啤酒瓶上缠几圈，而后把瓶子击破，将碎玻璃去除，把原种装入小盆内待用。接种时，用接种匙把原种装入小菌袋的两头即可。最后要把接好种的小菌袋放置于温度较恒定的地方培养，一般20天左右菌丝可长满全袋。
提醒：在摆放接好种的小菌袋时要注意，由于菌袋中还残存余热，且菌丝在生长中也会产生大量的热量。因此不宜堆放过高，一般呈“井”字形堆放3～4层即可，以利于通风散热，避免“烧菌”。另外，一级栽培种在培养过程中要经常进行翻袋，防止热量积聚，同时也要检查菌丝生长情况及有无感染等，一般整个培养过程翻袋3次即可。菌丝长满后需立即转接至大菌袋，不然易造成菌丝老化，降低其生产效能。
一级栽培种→二级栽培种
目前平菇栽培多以生料栽培为主，培养料以棉子壳为主，另外适量加入玉米心、麸皮、石灰或石膏、糖或玉米面、微量元素、无机盐等，以使营养全面、均衡。由于为生料栽培，故培养料用前要进行药剂杀菌处理。方法：在培养料加水掺混时，拌入克霉灵（二氯异氰尿酸钠），每0.5公斤克霉灵拌500公斤培养料，然后用塑料薄膜将其覆盖，闷12小时左右，最后，将培养料分装于大菌袋中即可。注意，该环节宜采用“四层菌种三层料”的方式进行分装播种，以加快发菌速度，提高出菇效果。按照此方法，一小袋栽培种可分装2～3个大菌袋。
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