一、无菌苗分切供试品种:彩色马蹄莲无菌试管苗来自中国农业科学院蔬菜花卉研究所。共有8个品种(颜色),50瓶,每瓶4~6个芽丛,芽丛高3~4cm,颜色浅绿,苗株生长势一般。将苗瓶放在距紫外灯源2m处,打开紫外灯消毒60分钟,然后置于培养室内的培养架上培养5天。以备分切。 将瓶苗置于无菌条件下,小心从瓶中取出,根据小苗生长状况,切去过长叶片(叶高达2cm以上),保留块茎基部小叶,将彩色马蹄莲丛生块茎纵切,每小块上保留2~3个小叶,接种到添加不同类别激素的MS培养基上,每瓶接3~4个小块,培养基组成分别为:I.MS+6BA 2.0mg/L+ NAA0.02mg/L;II.MS+6BA l.0mg/ L+NAA 0.1mg/L;Ⅲ.MS+6BA 2.0mg/L+NAA 01mg/L;Ⅳ.MS+6BA l.0mg/L+NAA 0.05mg/L。
二、无菌苗增殖将分切小苗置于培养室的培养架上,培养室控制温度25℃±2℃,光照强度为2000lux,光照时间为12小时/天。经培养1周后,芽体开始达 1:10~1:20伸长,并有小的芽体开始萌动。培养2~3周后,在芽体周围开始形成丛生小芽,培养4~5周,叶片伸长,叶高的可达3~5cm高,最低不到lcm。在密生小叶的块茎上仍可见到密生的萌动小芽体。 试验表明,彩色马蹄莲无菌苗,在添加不同浓度的6BA和NAA培养基上,均可大量增殖,增殖速度在 25—40天内可达1:10~1:20。各品种的马蹄莲在适宜的培养基中,均能诱导出芽苗,但各品种间形成的芽的数量,以及芽丛的生长速度存在着一定的差异。最多的品种每瓶可分切20多瓶,最少的也能分切10余瓶。
三、生根壮苗培养无菌苗在培养室培养30天以后,将高度在2-3cm以上的无菌苗,转入生根培养基进行生根壮苗培养,7~15天以后,均有较多的根系生成。试验表明,在MS培养基中添加 NAA 0.3mg/L;IAA 0.2mg/L;NAA 0.3+IAA 0.2mg/L的不同激素组分中,以 MS加IAA 0.2mg/L的生根培养基中,小苗生根率最高为96%,且根系短而粗,根系分布均匀,白色,每株丛生根4~6条,植株叶色浓绿,生长健壮。在单纯添加NAA 0.2mg/L的生根培养基中,叶色深绿,根系生长较慢。 生根苗在瓶中培养2个月以后,仍不见有明显的块茎,但根系生长很快,并铺满瓶底,小苗叶片枯黄,随着培养时间的延长,逐渐干枯死亡。 四、组培苗移栽技术 将生根苗小心自瓶中取出,洗去培养基以后,按5cm×6cm的株行距移栽于泥炭土加珍珠岩各半的苗床上。苗床宽1.2m,长度依移栽苗量而定。移栽苗床搭小拱棚保湿,每天中午注意将棚两端掀开通风,移栽1个月内注意保湿并不定期向苗株喷洒千分之一大量元素稀释液以补充营养。移栽苗1个月以后开始迅速生长,此时适当增加光照并辅助叶片施肥,幼苗生长茁壮。(河南省职业师范学院 姚连芳 刘荷芬 李保;获佳县花卉大市场组培中心 张俊芬 453003)