测定一种药剂的药效好坏，可通过室内毒力测定和林间药效试验。室内毒力测定主要是测定一种药剂的毒性、毒力或比较几种药剂毒力的大小。室内试验的结果，除可作为药剂的初步筛选的根据外，还可为林间试验提供参考。有时在林间发现的问题必须拿回室内作比较精细的试验研究。林间试验主要测定或比较药剂在林间条件下的药效，其结果比较接近实际情况，为生产防治提供可靠的依据。
1．室内毒力测定
进行室内试验要注意：①供试生物应该是由同一环境下培养得来的，或采自林间同一环境的，在生理、发育上愈一致愈好。②供试药剂必须纯净（原油或原粉），至少要有确切的有效成分含量。③在控制的条件下进行试验，施药要均匀一致。④试验一般要求每种处理有3－5个重复，每个处理要有50－100头昆虫（菌类孢子一般为在显微镜10×10视野内有100个左右，每次计算必须移动玻片检查3次）。⑤各种试验必须设立对照。所设对照有：完全不处理的（在自然状况下的），即所谓“空白”对照；不含有效成分的制剂或清水对照，用标准药剂处理的对照。
（1）杀虫剂的毒力测定方法
1）喷雾法：模拟林间实际防治情况下而设计的喷雾方法，为了减少试验误差，使每一个供试昆虫尽量接受到相同的药量，要求喷雾器有一定的压力，使雾点大小一致，喷雾均匀。
2）液浸法：将供试昆虫分别放入不同浓度的稀释药液中浸渍一下，立即取出，放在吸水纸上吸去过多的药液，移入每一组的盛器中，给以新鲜叶片作饲料，盛器上加盖纱布或纱网，饲养于室内，记录室温，观察不同时间下中毒死亡情况。
3）药膜法：将药剂喷撒在一定面积的表面上，形成一层均匀的药膜（常用垫有滤纸的培养皿，或将针叶在药液中浸渍一下后取出），然后让供试的害虫在上面，任其与药膜接触一定时间后，再移回正常的容器中饲养，或就在接触药膜过程中，观察中毒死亡情况。
4）点滴法：用定量的药液微滴，滴加在供试昆虫的胸部背面，然后定时观察中毒死亡情况。此法优点是：剂量可用每克虫体接受的药量（常用微克）表示，药量容易控制，试验误差较小；缺点是费时，处理所用的溶剂、点滴的部位和液滴的大小等都可影响毒力。在采用本法时，应当考虑这些因素，尽量取得一致，才能得到准确的结果。
（2）杀菌剂的毒力测定方法
1）孢子萌发测定法：将不同的药液喷布于玻片表面或平板上，定量滴加孢子悬浮液，药液接触后，经一定培养时间，镜检孢子萌发的百分率。
2）抑菌圈法：将病原菌孢子或菌丝的悬浮液与琼脂培养基混匀，冷凝后，在培养基平面放上消毒的并蘸有不同浓度药液的圆形滤纸片（直径6毫米左右），经定温培养一定时间后，由于药液的扩散作用，使病菌生长受到抑制，即形成“抑制圈”。测量抑制圈的大小，以比较杀菌剂的毒力。
3）生长速率测定法：在琼脂培养基中加入药液，冷凝后接菌的方法，经24－48小时后，观察菌落生长情况，计算生长速率，并与不含药剂的对照组生长速度相比较。
（3）杀虫剂、杀菌剂的毒力表示方法：药剂的杀虫或杀菌毒力，常用“致死中量”表示，即杀死生物种群半数（50%）所需用的剂量（median lethal dose，毫克/千克）常简写为LD50。如果浓度表示剂量，则为“致死中浓度”，简写为LC50。杀菌剂则以ED50或EC50来表示，即抑制50%孢子萌发所需的剂量或浓度。
在测定药剂毒力时，一般常用一系列的剂量（或浓度）对多组生物分别测定死亡百分率，再以不同剂量与相应的死亡率画成“剂量－死亡率毒力曲线”。在纵坐标从死亡率50%处引出一平行于横坐标的线与曲线相交。该处的剂量（或浓度）即为LD50（或为LC50）。但是由于这一曲线是S形的，不易精确地求得LD50或LC50的数值，同时用S形曲线也不易与其他曲线进行比较。因此，必须把这一呈S形曲线改成一条直线，常用统计方法是将剂量用对数值表示，将死亡率用机率值表示，就可以将S形曲线改为一根直线，这一根直线常称“剂量对数-机率值直线”。死亡率查机率（见附表2机率与死亡百分率换算表）。从这一直线的坡度，还可得知供试生物对该种药剂敏感性差异的程度，即坡度越大，表示供试生物个体间差异越小；坡度越小，表示差异越大。
室内毒力测定时，在不施药的对照组中，出常出现少数自然死亡的个体，如果自然死亡率在5%以下，一般仅把处理组的死亡率减去自然死亡率即可得到校正死亡率。当自然死亡率达到5%~20~时，就不能用直接相减的方法，应按照下列公式计算处理组的校正死亡率，如果自然死亡率超过20%时，则该批供试生物不宜作试验或试验应重做。
对照组生存率－处理组生存率
处理组的校正死亡率(%)=-------------------------------------×100%
对照组生存率
2．林间药效试验
林间药效试验的小区或大区的面积大小，取决于地形条件、林木种类、病虫习性和试验要求。用药处理前后，必须调查病虫害为害程度的变化，通常采用“随机取样”方法调查，常有对角线法、大五点法、棋盘式法、平行线法、分行法等。病虫害发生比较普遍，分布比较均匀，危害较重，可采用五点取样法或棋盘式法；病虫害分布不均衡，形成大小及形状不相同的核心分布型，并自核心向外放射性蔓延，可采用平行线法。取样大小（如标准株数）直接关系到结果的正确程度，应根据具体条件、病虫种类等情况，决定取样大小。例如调查金毛虫虫口密度时，虫口密度大的，抽标准株数少些；虫口密度小的，抽标准株数多些，一般约20－30株。
药效试验结果，最常用的是害虫死亡率、虫口减退率、枯梢率等。病害试验结果可用发病率、普遍率、感染指数等表示。一般当害虫虫口密度基本上是一定的，则处理后的虫口数一定减少，而不会增加。对这类害虫试验结果的统计，只要计算死亡率或虫口减退率即可。
害虫死亡率（或虫口减退率）（%）
施药前害虫平均活虫数—施药后害虫平均活虫数
=--------------------------------------------×100%
施药前害虫平均活虫数
当自然死亡率在5%－20%，应进行校正。为此，在试验设计时应加不施药的对照区，这样就能计算校正死亡率或校正虫口减退率。
害虫校正死亡率
施药区死亡率（减退率）－不施药对照区死亡率（减退率）
=------------------------------------------------------ ×100%
100－不施药对照区死亡率（减退率）
另一类害虫（主要是蚜、螨）。它们的繁殖力很加，不仅对照区虫口数要比施药前增加，就是施药区的虫口数也有减有增。因此，运用上述校正死亡率或校正虫口减退率（%）公式时，凡遇不施药对照区虫口数增加的，则在公式中改用“+”号。
杀菌剂药效试验的调查及结果的处理方法也因病害种类、危害性质而异。如苗期病害，可随机或定点取样，检查一定数量的苗株，计算发病率。根据施药前、后的发病率，计算病害减退率或防治效果。
病苗（株、叶、秆）数
发病率（或普遍率）（%）= ------------------------×100%
检查苗（株、叶、秆）数
有些病害如落针病、叶斑病等，因同一植株上或不同植株上危害程度有轻重之别，可根据落针数或叶上的病斑数，分成若干等级，例如分为0、1、2、3、4、5等六级，级数可按具体情况或多或少。分别检查药剂防治区别和不施药对照区的各级病叶数，计算防治区和对照区的病指情指数。计算方法如下：
∑（级别代表值×本级病株数）
病情指数（或感病指数）（%）=---------------------------×100%
检查总株数×最高级别代表值
式中：∑是各级乘积数值的总和。
用病情指数进一步计算防治效果：
对照区病情指数（或发病率）－防治区病情指数（或发病率）
防治效果（%）=
------------------------------------------------------×100%
对照区病情指数（或发病率）
关于除草剂的除草效果可用下式计算：
对照区杂草数量（鲜重，克）－施药区杂草残留量（鲜重，克）
防治效果（%）=---------------------------------------------------------×100%
对照区杂草数量（鲜重，克）
