1.菌种生产母种、原种、栽培种选择全营养高氮型菌种，通用培养基按配方一次性制备。母种培养基用18×180毫米的玻璃试管盛装，放入口径22～24厘米高压锅内灭菌40分钟；原种和栽培种培养基用500毫升罐头瓶或500毫升生理盐水瓶盛装，放入太空灭菌包（自制材料费约10元，可盛500～800瓶）内灭菌3～4小时，或置入常压灭菌锅（上蒸锅）内灭菌8～10小时，冷却至常温后取出。接种用新开放型食用菌无菌接种器（自制材料费3～5元），直接将上述培养基分别置于接种器的操作平台上，随机进行母种、原种、栽培种全流程全开放式扩繁移植转接种。接种后，置1.5～28℃洁净环境中遮光培养，一般8～12天菌丝可长满培养容器，较常规制种方法缩短周期30～40天。
2.培养料配制将栽培过其他种类食用菌的菌糠分别敲碎、晒干、称重。按干重加入木屑或草屑30%、玉米混合粉（将玉米碎成黄豆粒大小的皮、粉、粒混合物）10%、干牛粪或干鸡粪6%、石灰粉2%、草木灰3%、石膏粉1%、固氮肥0.2%。加水翻拌使含水量达65%左右，拌匀后上堆发酵，中间翻堆2～3次。
3.装料接种①生料接种：将发酵好的培养料按常规法装袋，每袋两头和中间各接入全营养高氮型EC05鸡腿菇栽培种40～50克；②熟料接种：常规法装袋，放太空灭菌包内灭菌4～5小时或放入常压灭菌锅内灭菌8～12小时，取出后用新开放型食用菌无菌接种器全开式打开袋口接种，每袋两头各接入全营养高氮型EC05鸡腿菇栽培种40～50克。接毕，置洁净室内，遮光适温培养至菌丝满袋。
4.菌床出菇将长满菌丝的菌袋直立排放在出菇场地面形成菌床，打开袋口拉直袋筒膜，向袋内料表面覆肥土2～3厘米厚，喷水润湿覆土，筒口膜表面盖1层报纸，喷水，使空气相对湿度达85～95%，至头潮菇采收。收完后将菌袋换向，未出菇一头袋口向上，重新排菌床，开袋口，覆肥土，养菌出菇至收完。菌袋两头采菇后，脱去袋筒膜，把菌棒从中竖切，切面向上排成菌床，床面覆肥土2～3厘米厚，喷水润湿覆土，土表盖报纸或罩拱膜养菌出菇，还可采菇2～3潮，总生物转化率250%左右。
5.适时采收EC05鸡腿菇最突出的特点是粗放、抗杂、抗衰老，菌丝不粘土，且覆土后菌丝体在土壤内可随气侯及季节变化越冬或越夏，气温适宜时（8～32℃）自然恢复生机破土出菇。生育期无病虫害发生。当子实体向上伸长至20～30厘米、菌盖紧包菌种、菌环刚刚松动呈未撑开的雨伞状时及时采收，慎防菌盖边缘脱离菌柄、开伞、自溶或变黑，失去商品价值。采收时用手轻轻提拉菇体旋转拔起，用利刀削除菇脚泥土，即可上市鲜销或加工成盐渍品出售。
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