1、植物
竹节秋海棠(B.President-carnot)
2、质料种别
叶子、叶柄、茎段
3、造就前提
以MS为根本造就基。引诱愈伤组织造就基:(1)MS+BA3――5mg/L(单元下同)+NAA0.1――0.5。丛生芽增殖造就基。(2)MS+BA1.0+NAA0.1。(3)MS十BA0.5十NAA0.1。(4)壮苗造就基:1/2MS(液体)。(5)引诱生根造就基:1/2MS+NAA0.2。上述造就基均加3.0%蔗糖、0.8%琼脂,pH值5.8。造就温度(24±2)摄氏度,光照不宜过强,有80Olx阁下便可,光照10h/d。
4、扩大与分化情形
(一)无菌质料取得将竹节秋海棠已崎岖之幼嫩叶子、叶柄、茎段先用过多洗衣粉对水洗濯,然后用自来水重复冲刷,于无菌前提下用75%酒精药棉擦拭洁净,放于饱和漂白粉溶液10分钟,后置于0.1%升汞溶液中消毒2分钟,用无菌水冲刷5――6次,消毒滤纸接收干外貌水份,叶子切成0.5cm见方小块,叶柄、茎段则切成约长1cm阁下长条,均接种于造就基(1)上。
(二)丛芽的引诱与增殖接种、造就1周后,叶、叶柄、茎段四周开端膨年夜、增厚,质地变硬,逐步情势黄绿色愈伤组织,3周后徐徐分化出小芽点,芽点持续扩展,约5周阁下构成显着的丛生芽。将丛生芽切成小块,接种于(2)和(3)造就基长进行增殖,小芽丛上不停分化出很多小苗。叶、叶柄、茎段在两个造就基上增殖速度根本雷同,约4周阁下继代1次,增殖系数可达6――9。
(三)壮苗在举办年夜量增殖阶段后,我们制止固体造就而改成液培,将分化芽转接到1/2MS,3周后,可发明扩大结实、一些细弱的无根苗。这为今后生根、移苗出瓶,进步顺应外界状况,增加抗病才能,提供了优秀前提,移栽更容易成活。
(四)根的引诱将高约3cm、扩展健硕的无根壮苗,接种到造就基(5)上。2周后,苗基部长出辐射状白色小根,每株生根5―7条,3周后,根伸长至1.0―1.5cm,生根率达100%。
(五)试管苗的移栽将造就有试管苗的三角瓶盖翻开,在试验室透风处炼苗3d,掏出幼芽,洗去根部残留造就基,栽种前根部在0.2%Na2SO4溶液中滞留片晌。移栽到用高压灭菌消毒过的蛭石+细沙+园土(1:1:1)的混淆基质中,地上部喷施0.1%多菌灵溶液,用薄膜包围,天天喷水2次,1周后揭膜,成活率在95%以上。