外植体选取从成长在田间或盆栽的优异品栽培株上,选取成长健壮、无病虫害的当年生枝条的茎尖和幼茎。取材最好在晴天正午,并且取用植株上部的幼茎。阴雨天或依靠近地表的幼茎,表面污染较为严重,难于消毒。玫瑰除用茎尖和幼茎做外植体外,也能够用叶子、叶柄、根、茎、原生质体、胚、花药、子房、花萼和花托做外植体。
消毒灭菌及无菌苗的建立取玫瑰外植体,用5%-10%的次氯酸钠浸泡10-30min或用01%-02%的HgCl浸泡5-15min。用无菌水清洗7-10次后接种。也可先用75%的酒精浸泡20-30s再采用上述办法消毒。消毒灭菌完毕后,将幼茎切割成05-10cm长的至少带有一个节的切段,接种于培养基中。