摘要:在大花蕙兰组培快繁过程中,植物激素对原球茎的诱导、增殖及小苗的分化有明显影响。细胞分裂素6~BA和成长素N从最佳配比对大花蕙兰组织培养很关键,尤其是细胞分裂素影响较大。
关键词:大花蕙兰;组织培养;植物激素 大花蕙兰(Cymbidium)是兰科兰属中一个别大花附生种及其杂交种的统称,属复茎地生兰或半附生兰,原产地在喜马拉雅山脉及东南亚高山上,是世界五大主要商品兰花之一,近几年在我国花卉市场上流行的高档室内盆栽花卉,具有极高的观赏价值,株型高大雄伟,花大而多,色彩明艳。由于大花蕙兰多为杂交种,种子养殖无法坚持其品质特点,其结实率也相当低,分株能力弱,因而养殖系数低,养殖速度慢,远远不能满意商品化生产的需求,而采用组织培养办法进行原球茎增殖能够达到工厂化生产目的。试验研究植物激素对大花蕙兰组织培养迅速养殖的影响,并成功地建立了快繁体系,能够用于工厂化育苗。
1、材料与对策
1.1材料
大花蕙兰采自河南农业大学兰花园中FN4品类,切取健康饱满10-15 cm长的芽,剥去外部叶子直到5 mm大小,消毒处理后作为外植体诱导材料。
1.2 植物激素对原球茎诱导的影响
以MS为基本培养基,6~BA设0.5、1.0、1.5、2.0 mg/L(单位下同)4个浓度水平,NAA浓度为0.2 mg/L,培养基均附加香蕉汁100 g/L,活性炭0.5 g/L,每处理接10瓶,每瓶接1个茎尖,培养30 d后,调查原球茎诱导率。
1.3植物激素对原球茎增殖及小苗分化的影响
将诱导的原球茎分别接种于下列差别培养基中:① MS+6~BA 1.0+NAA 0.1;②MS+6~BA 1.0+NAA0.5;③MS+6~BA 1.5+NAA 0.1;④MS+6~BA l.5+NAA 0.5;⑤MS+6~BA 2.0+NAA 0.1;⑥MS+6~BA2.0+NAA 0.5,以上培养基均加入香蕉汁130 g/L,活性炭1.0 g/L。每瓶接种10个原球茎,每处理10瓶,培养40 d后,调查增殖系数及成苗数。
1.4植物激素对小苗生根的影响
将原球茎增殖及幼芽分化培养中高于2 cm的新苗切出,转接到下列生根壮苗培养中:①1/2 MS+6~BA0.1+NAA 0.5;②1/2 MS+6~BA 0.3+NAA 0.5;③1/2 MS+6~BA 0.5+NAA 0.5;④1/2 MS+6~BA 1.0+NAA0.5,每种培养基均附加香蕉汁150 g/L,活性炭1.5 g/L。每瓶接20个新苗,每处理10瓶,30 d后统计生根率及成长状况。以上MS培养基中白糖浓度为30g/L,1/2 MS培养中的白糖浓度为20 g/L,琼脂为7g/L,pH值为5.3。培养条件:温度为24-26摄氏度,光照强度为1 000-1 800 lx,光照时间12-14 h/d。
2、结果与解析
2.1植物激素配比对原球茎诱导的影响
从表l能够看出,随着6~BA浓度的增大,原球茎诱导率逐步增高,在6~BA 1.5时达到最大,6~BA浓度再增大,原球茎诱导率降低,成长中发现细胞分裂素低浓度发生原球茎慢,并且诱导出原球茎数目少,高浓度产生愈伤多,原球茎少。在培养基MS+6~BA 1.5 mg/L+ NAA0.2 mg/L+香蕉汁100 g/L+活性炭0.5g/L原球茎诱导率达到90%,并且每个茎尖分化出4-5个原球茎。表1 植物激素配比对原球茎诱导的影响 6~BA/mg·L~1 NAA/mg·L~1 诱导率/% 原球茎分化状况 0.5 0.2 10 茎尖很少分化 1.0 0.2 40 茎尖产生2-3原球茎
1.5 0.2 80 每个分化4-5个原球茎 2.0 0.2 20 第个分化1-2原球茎
2.2植物激素对原球茎增殖及小苗分化的影响
大花蕙兰原球茎在增殖的过程中有新苗的分化,长时间不转接,会产生许多苗,因此增殖与幼芽分化同时进行。合理的激素配比会达到梦想增殖与成苗。从表2能够看出,随着细胞分裂素的增大,原球茎增殖系数也增大,但小苗分化数却随着下降,综合考虑增殖与成苗,培养基④最好,因此最佳增殖及小苗分化培养基是 MS+6~BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+香蕉汁130 g/L+活性炭1.0 g/L。表2 差别激素配比对原球茎增殖及小苗分化的影响 培养基编号 接种总数/个 原球茎总数/个 增殖系数 分化苗数/个 ① 100 420 4.2 110 ② 100 610 6.1 130 ③ 100 1080 10.8 210 ④ 100 1150 11.5 480 ⑤ 100 1100 11.0 120 ⑥ 100 1230 12.3 160。
2.3植物激素对小苗生根的影响
小苗接在4种不一样的生根培养基上均能生根,随着细胞分裂素浓度的增大,生根率逐渐下降,说明细胞分裂素对生根有一定的促使作用,但浓度加大导致增殖影响生根,培养基①生根率高,生根条数多,苗长得好。故生根壮苗最佳培养基是1/2 MS+6~BA 0.1 mg/L+ NAA0.5 mg/L+香蕉汁150 g/L+活性炭1.5 g/L。表3,植物激素对幼芽生根的影响 培养基编号 接种株数/株 生根株数/株 生根率/% 平均根长/cm 苗长势 ① 200 198 99 >4 苗高,长势均等,较绿 ② 200 150 75 2-3 中等高度,较绿 ③ 200 120 60 1-2 成长缓慢,浅绿 ④ 200 60 30 <1.5 成长极满慢,浅绿。
3、小结与讨论
植物激素中的细胞分裂素6~BA和成长素NAA对大花蕙兰FN4组织培养迅速养殖影响更大。原球茎最佳诱导培养基是MS+6~BA 1.5 mg/L+NAA0.2 mg/L+香蕉汁100 g/L+白糖30 g/L+活性炭0.5g/L+琼脂7.0 g/L,原球茎诱导系数可达到4-5。
原球茎增殖及新苗分化培养基是MS+6~BA1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+香蕉汁130 g/L+活性炭1.0 g/L+白糖30 g/L十琼脂7.0 g/L,探索最佳增殖与小苗分化培养基中激素配比对大花蕙兰FN4工厂化育苗有很强意义。生根壮苗培养基1/2 MS+6~BA0.1 mg/L+NAA 0.5 mg/L+香蕉汁150 g/L+活性炭1.5g/L+白糖20g/L+琼脂7.0 g/L。 (田志强 河南农业大学科技处)