大花蕙兰,是对兰属中经过人工杂交培育出的、色泽艳丽、花朵硕大的品类的一个统称。兰属植物约48种,目前用来作杂交亲本的原生种有近20种,重要是大花的附生类以及少量的地生类。
大花蕙兰是兰属人工杂交种。自1889年英国培育出第一个大花蕙兰品类早先,在20世纪40年代,欧美也选育出大量种间和品系间杂种。至今,大花蕙兰的种植品类已有近2万个,在国内外市场十分走俏,成为兰花中的庞大品系群。
大花蕙兰组织培养工厂化生产技术 一、启动诱导
(一)母株的选择。母株的选择应遵循三项基本原则:1.整个群体体现出该品系的典型性状;2.群体成长发育良好,没有普遍形成特定病害浸染,特别是东亚兰花叶病毒,齿舌兰轮斑病毒;3.在符合上述条件的群体中选择性状优良的健壮单株作母株。
(二)外植体处理。选择叶子未完全展开的肥壮营养物质芽(勿选花芽)为外植体,先剥去2-3片外层叶子,再手持兰花叶芽梢,切去基部胜物及伤害、老化组织,最后逐层剥净外层叶子,直至有小顶芽和小侧芽露出。然后在超净工作台上先用70%的酒精浸泡外植体30秒,用无菌水冲洗后,再放入0.1%的氯化汞溶液中浸泡8分钟左右,再用无菌水冲洗3-4次,然后在无菌接种盘上注意切下顶芽和侧芽。
(三)圆球茎诱导与驯化。将切下的顶芽和侧芽插入诱导培养基中,基部向下,稍稍露出芽尖。然后将其置于培养室中进行培养,光照强度1000-1500勒克斯,光照时间每天14小时,培养温度25摄氏度左右。10天后芽开始萌动,诱导率在85%以上。在圆球茎的诱导过程中,有80% 左右的芽萌发后很容易长成幼芽。诱导30天后,待幼苗长至4厘米、基部膨大时,将苗切离基部,并将膨大基部纵切成厚3-4毫米的薄片,切口向下重新放入相同的新鲜培养基中,30-35天从下端切口位置可长出好像愈伤组织的圆球茎,其中顶芽诱导率最高,诱导速度也最快,侧芽次之。
二、继代增殖和幼芽分化将圆球茎接种于继代培养基中,然后将其置于培养室中培养,培养温度25摄氏度左右,光照强度3000勒克斯,光照时间每天10小时。每 45-50天继代一次,增殖倍数可在10倍以上。继代增殖初期用浓度为1.5×10~6至2×10~6的6~BA(植物成长调节剂)能够较快地积累材料,随着继代次数的加强,特别是15代早先或变种株开始形成后,只能用浓度为0.5×10~6至1.5×10~6的6~BA(植物成长调节剂),并在生产中准时舍弃变种的圆球茎。变种的圆球茎表面只是光滑一片,没有芽尖,不能分化出芽苗。当圆球茎继代到所需数量时,直接将完整的圆球茎转移到新鲜的增殖培养基中,不要纵切支解,也不要切除芽尖,让圆球茎表面的芽尖直接分化萌发为幼苗。
三、生根与炼苗当苗长至3厘米高、有2-3片叶时,即可将苗注意切离基部,转入壮苗生根培养基中,然后将其置于培养室中培养,培养温度25摄氏度-28摄氏度,光照强度5000-6000勒克斯,光照时间每天12小时,20天左右开始生根,35天可进行炼苗。大花蕙兰瓶苗移栽前先移入遮阳棚内,在自然散射光下(7000-8000勒克斯),光照时间每天8-12小时的环境中摆放15-20天,可显著提升瓶苗的质量和栽植成活率。当瓶苗叶色浓绿、叶子坚挺、植株健壮时,即可出瓶移栽。