摘要:使用分段RT~PCR法成功地从云南红豆杉叶子总RNA中分离出两条长约1.4kb和1.5kb的cDNA片段,克隆到pUCm~T载体中,序列拼接剖析表明,该cDNA片段与Wildung M R 等发表的紫杉三烯合成酶基因编码区2568bp有41个核苷酸区别,同源性为98.42%,具有编码862个氨基酸蛋白质的能力。为了检测所克隆的基因编码产物是否具有活性,并进一步制备抗体以便于将来转基因植物的检测,构建了一个酵母表达载体GAPA~T14;为了转化植物构建了两个具有差别启动子的植物表达载体,PBI121~T14(含35S启动子)和pBIH~T14(在pBI121的基础上以胶乳特异启动子)。
关键词:云南红豆杉;紫杉烯合成酶;植物表达载体;cDNA克隆;紫杉酶
中图分类号:Q78
文献标识码:A
文章编号:1007~7847(2005)01~0024~05 原版全文