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食用菌栽培种植 | 黑木耳液体菌种制作规程

时间 : 04-13 投稿人 : 瑞永 点击 :

工艺流程:斜面菌种→初级摇瓶种→二级摇瓶种→发酵罐深层发酵种→接种

黑木耳液体菌种制作规程 | 菌菇种植

一、摇瓶种的制作

1斜面菌种准备:马铃薯200克(去皮切块煮沸过滤取滤液),蔗糖20克,麸皮30克(煮汁过滤取滤液)二氢钾2克,硫酸镁1克,琼脂20克,VB1 10毫克,水1000毫升。25度培养7天备用。

2、初级摇瓶制作 ①配方 土豆200克 葡萄糖20克

酵母膏 2克 蛋白胨3克 磷酸二氢钾2克 硫酸镁1克

VB110毫克 水1000毫升。(配方2:玉米粉4%,蔗糖3%,麸皮2%,酵母膏0.5%,2氢钾0.25%,硫酸镁0.1%,VB1 0.01%,豆油0.05%)。

②制作:土豆去皮切成薄块,煮沸后保持20分钟,四层纱布过滤后取滤液,补足1000毫升水,称取其他成份,与土豆液充分搅匀然后装入三角瓶。

初级摇瓶采用500ml三角瓶,装入200ml,放入玻璃球5粒(0.5cm直径)用二层纱布包裹制作棉塞,塞紧棉塞后再用二层纱布外层加报纸做罩,扎紧瓶胫,防止摇动时棉塞活动。

③灭菌:把三角瓶放入立式高压锅,加足水紧好盖,开启放气阀,接通电源,有蒸汽冒出时关闭放气阀,待压力表达到0.05MPa时,断掉电源,打开放气阀,放冷空气至压力表回0,再关闭放气阀,接通电源,当压力表显示0.11 MPa,温度达到121℃后开时计时,保持45min。断电使其自然降至0.02 MPa时放气归0,趁热微开盖,使剩余蒸汽烘干棉塞,然后出锅降温至25℃即可接种。

④接种:首先,封闭接种室,用开启紫外线灯30分钟,再用臭氧灭菌器灭菌60分钟或用烟雾剂每立方5克熏蒸30分钟,进行接种环境灭菌。把灭菌后的三角瓶放入超净台(或接种箱),把斜面母种、工具、酒精灯、75%的酒精棉球瓶同时放入,母种用灭过菌的报纸遮盖,打开紫外线灯和无菌风开关,保持15min后,关闭紫外线灯进行接种。操作人员应着干净的隔离衣,带好卫生帽、口罩,手洗净,用75%酒精擦拭手、母种试管、工具,点燃酒精灯,灼烧工具及试管口20秒,在严格无菌操作程序下,把斜面菌种切割成0.5厘米小块(不带培养基),移入三角瓶中,使其浮在液面,一般接入5-6块,塞好棉塞,接完后重新封好棉塞罩,放到25℃恒温环境净置培养72小时。

⑤初级摇瓶培养。当静置培养72小时后,液面菌种长到1厘米大,无污染,即可将三角瓶放到小型摇床上,一般能放6瓶(也可使用电磁摇床),固定好三角瓶,保持培养温度25℃,启动开关,调速至140r/min,培养96小时,当菌液颜色清亮、菌球密集,占整个培养液的80%以上,瓶口处有很浓的菇香味,可作为二级摇瓶扩大培养的种子使用。

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