接种前必须使用瓶温降至30摄氏度左右，防止高温接种热死菌种。有冷却完在冷却完接种，每支母种可转3～4瓶原种，接种前首先把接种箱（室）打扫干净，喷2%来苏儿。再把已灭菌好的菌种瓶及工具全部搬入进去，然后按常规对接种箱（室）进行严格消毒。
接种需要严格按照无菌操作进行。接种者取好菌种块的同时打开原瓶塞，接种者将菌种块取出，快速接入原种瓶，然后将棉塞过火焰后塞好就可。
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