菌种生产在YPH9红平菇栽培过程中是重要的准备性工作，原种制作是菌种生产的重要步骤。
（1）配方：小麦粒98%，白糖和石膏粉各1%。
（2）配制方法：将麦粒称量后，用清水淘洗干净，置清水中浸泡10～15小时，滤水后放入沸水中煮沸25～30分钟（无白心），滤水后与白糖和石膏粉混拌均匀，冷却 后装入750毫升菌种瓶内，麦粒装至瓶肩，用棉塞堵封瓶口。也可将麦粒装入500毫升生理盐水瓶内，装至500毫升刻度线，用棉塞堵封瓶口。装完后放入高压灭菌锅内，在1.4千克/厘米2蒸汽压力下保持2～3小时离火，当压力表指针自然回到“0”位时，打开锅盖，待热蒸汽散尽，锅内温度降至40℃以下时将料瓶取出。
（3）接种培养：接种在接种箱内进行，操作者依次将上述培养好的YPH9红平菇一级母种斜面菌丝试管、麦粒料瓶（二级原种培养基）、酒精灯、消毒杯、甲醛、高锰酸钾或气雾消毒剂、酒精棉球、接种锄、接种铲、火柴放入接种箱内，按转接母种的操作方法对接种箱进行密闭消毒灭菌。母种试管口消毒灭菌在酒精灯焰上方3～5厘米处的火焰无菌区内停留，接种锄过火灼烧伸入母种试管5厘米冷却10秒钟，再伸入管底在母种菌丝斜面上从管底自下而上间距1厘米作横切划痕，钩除上端1厘米的菌丝斜面和管壁的气生菌丝，再取接种铲在酒精灯焰上烧烤后伸入母种试管5厘米处冷却10秒钟，用接种铲口在母种菌丝斜面上自上而下从中作一条直线的纵切划痕，把已作横切划痕的菌丝斜面一分为二成两块。
接种铲垂悬于母种试管内。右手取下麦粒料瓶棉塞，置左手掌心，用拇指按压，右手再取接种铲，分3次从母种试管内挑取3块菌丝块接植于原料培养基的麦粒粒面，将3块菌丝块分布均匀形成三点式，接种铲试管内垂悬，右手取左手掌的棉塞在酒精灯焰上过火后堵封瓶口，依次进行转接。接毕，置20～28℃洁净环境遮光培养，一般10～15天菌丝可长满瓶，即可用于转接栽培种。
