银耳菌种必须同时有银耳菌丝和香灰菌丝才能出耳，怎样制作银耳菌种的母种？下面来简单介绍一下。在制作母种的过程中，可以选用耳木分离法和孢子分离法。
一、耳木分离法
耳木分离出来的菌种，已有银耳菌丝和香灰菌丝。其分离步骤如下。第一步，当1~2批银耳生长时，选择银耳生长旺、朵大、色白、肉厚、开片正常、产量高、无病虫害的耳木，从长有子实体的部位锯下1~2厘米厚的一段，去掉耳基及树皮，用75%的酒精涂擦其表面，然后放入消毒的接种箱内。
第二步，把木块浸入0.1%升汞液中20~30秒钟，用无菌水冲洗残留的药液，再用无菌纱布揩干。
第三步，用消毒的小榔头和解剖刀先劈取耳基附近的木片（选有大理石花纹处），再把木片劈成如火柴杆粗的小木条（或用利刀削下粉末状的木屑）。
第四步，用消毒的镊子把一个木条（或小木屑）接入斜面培养基中。
第五步，把试管置23~25℃培养，当木条上（或木屑上）长出纤细的白色菌丝，并延伸至培养基上。这时培养基的颜色变黄转黑，表面出现浅灰色斑纹，这就是香灰菌丝。7天后，木条上出现短绒状菌丝，同时分泌白色或淡黄色水珠，这就是银耳菌丝。生长过程中发现红、绿、黄、黑等孢子和螨类害虫要及时淘汰，但浅黄色的凸起糊状小菌落是芽孢，不是杂菌。第六步，挑取少许银耳菌丝和香灰菌丝，接种于新的斜面培养基上，进行扩大，1周后菌丝长满试管，即成母种。
二、孢子分离法
孢子分离的菌种萌发成芽孢子（银耳孢子在一般马铃薯洋菜培养基上易形成芽孢子）或银耳菌丝，可用于栽培种复壮或同香灰菌丝混合制成母种。其步骤如下。第一步，取数只50毫升三角瓶，每只装0.5厘米厚的培养基，灭菌备用。第二步，选择朵大、肉厚、色白、开片正常、大小适中、无杂菌和病虫害、八九成熟的鲜耳作为种耳，移入消毒的接种箱中，用无菌水反复冲洗几次。
第三步，用消毒纱布或吸水纸，把耳片表面揩干。第四步，用消毒的解剖刀割取一小片耳瓣，挂于消毒的金属钩子上，迅速移入三角瓶中，钩子另一端钩在三角瓶口上，使耳瓣距离培养基表面2~3厘米，塞上棉塞。第五步，把三角瓶置23~25℃下培养48小时，培养基表面可见雾状的孢子及乳白色、糊状、边缘光滑凸起的小菌落。这时，在消毒的接种箱内取出钩子和耳瓣，塞好棉塞，继续在23~25℃下培养，2~3天后，培养基表面就出现乳白色、半透明状，略有光泽，表面粘稠，边缘光滑，中央隆起的芽孢菌落。
芽孢在一般培养基上不易萌发，但在以下几种培养基上可以萌发：玉米粉60%，木屑34%，骨粉1%，过磷酸钙1%，硫酸铵0.1%；细米粉98%，骨粉1%，硫酸铵0.1%；米粉50克，花生米（细碎）40克，蔗糖20克，琼脂20克，水1000毫升；马铃薯200克（去皮），琼脂23克，蔗糖20克，过磷酸钙2克，水1000毫升，pH5.6~6.2；细米粉500克，麦麸500克，骨粉10克，过磷酸钙10克，硫酸铵1克，充分混匀，用水调成膏状，搓条装入试管，用竹片压成斜面；同香灰菌丝配合，或在香灰菌丝浸出液制成的培养基上。
香灰菌丝分离法制作母种。其分离培养同前述耳木分离法，即用接种刀小心地去掉耳木表层老菌丝，取出深处有黑色花纹部分，捣成米粒大小，接种于斜面培养基上。香灰菌丝爬壁力强，挑取先端白色部分移管纯化，经3~5次纯化，可得到纯香灰菌丝。也可以取一瓶已长到底的银耳木屑菌种，把瓶打破，取出菌柱，用接种针刮上面的灰绿色或黑色处，取得少量孢子，接种于斜面培养基上，培养纯化。这两种分离方法，前一种生活力强。
也可以用混合培养制母种。把孢子分离法培养出来的银耳菌丝，和香灰菌丝分离法纯化得到的香灰菌丝混合培养，即成母种。值得注意的是，不同地区，不同耳木分离的银耳菌丝和香灰菌丝不能随便调换，随便组合，否则就有可能失败。母种培养方法是先将银耳菌丝接种于斜面培养基，置于25℃培养，待银耳菌丝直径长至1厘米，再接香灰菌丝，待菌丝蔓延至全试管，即为母种。必须指出，银耳菌丝少，香灰菌丝多，将来就不会出耳，或者出耳率很低。（百度 猪猪女孩偶遇）
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