制作香菇原种，在选择好母种，确认母种不携带杂菌的情况下，在培养基制作、培养基装袋（瓶）、培养基灭菌、母种接种、培养菌丝体等过程中，任何不当操作都有可能埋下感染杂
菌的隐患或遭受杂菌感染的风险，这就要求操作者在必须做好预防，今天重点就母种接种、培养菌丝体这两大步骤进行分析。
一、母种接种
香菇原种制作过程中，接种就是把母种在无菌条件下，接入原种培养基，需在接种箱或接种室中进行。接种环节最容易造成原种的杂菌感染，是原种制作防止杂菌感染的重中之重，以
下几点很容易使杂菌进入制作过程。
【1】接种箱或接种室消毒灭菌不彻底
在接种前，要对接种箱或接种室进行消毒灭菌。
⑴灭菌方法单一，长时间使用一种药剂灭菌，杂菌具有耐药性。灭菌后，杂菌残留，造成灭菌不彻底。
⑵接种箱擦拭消毒灭菌时，不全面，留有死角。熏蒸灭菌时，接种箱封闭不严，出现杂菌残留。
⑶接种室灭菌时，熏蒸灭菌，空间封闭不严，紫外线照射出现死角，造成杂菌残留。
【2】母种进入接种室处理不当
母种进入接种室和接种箱前后，对试管外壁和塞口擦拭不彻底，恰好外壁有杂菌。
【3】接种时没有严格执行操作规程
⑴使用没经消毒灭菌处理的接种工具或穿着未经消毒灭菌处理的衣物进行接种作业。
⑵接种时，接种人员走动，不经缓冲间，随意出入接种室，造成扬尘污染。
⑶接种箱接种，未在酒精灯火焰的保护下进行接种。
⑷接种室接种未开启接种保护器就进行接种。
⑸接种后，未及时扣盖，使菌种在空间暴露时间过长。
⑹违反接种操作规程等其他行为，造成杂菌残留。
以上这些操作都可能造成杂菌的侵入，致使原种受到污染。
★预防方法：
【1】多种消毒灭菌方法结合，保证接种箱和接种室接种时，处于无菌状态
⑴接种箱消毒灭菌采用百菌清喷洒、福尔马林或绿霉净擦拭，结合必洁仕或菇虫净气雾剂熏蒸灭菌的方法，不留死角地杀灭杂菌。
⑵接种室灭菌采用百菌清喷洒、必洁仕或菇虫净气雾剂熏蒸，结合紫外线照射的方法，干净彻底灭杀杂菌。
【2】做好母种试管进入接种箱和接种室前后的灭菌处理
进入前用75%酒精擦拭试管外壁，进入后用75%酒精对试管外壁和塞口再进行擦拭，之后，再打开试管塞，进行使用。
【3】严格执行接种操作规程
⑴做好更衣室、缓冲间的灭菌，接种工具和人员着装，在灭菌同时，接受灭菌，杜绝使用未经灭菌的接种工具。
⑵接种室接种时，人员进出必须通过缓冲间，尽量避免人员走动，以避免扬尘污染。
⑶接种箱在酒精灯火焰保护下进行接种。接种室接种全程开启接种保护器，在其保护下进行接种。
⑷接种完毕，立即盖好扣盖，尽量减少母种的空间暴露时间。
二、养菌
原种培养料基接种母种后，原种菌袋就将放入养菌室进行菌丝体培养，此时也会造成杂菌感染，感染途径有以下几种。
【1】养菌室消毒灭菌不彻底，造成杂菌残留
原种菌袋（瓶）进入养菌室之前，要进行养菌室的消毒灭菌，杂菌存在于养菌室的墙壁、地面空中及各个角落，消毒灭菌处理如不够彻底，将造成杂菌残留，条件适宜的条件下杂菌将
侵染原种菌袋（瓶）
【2】养菌室封闭不严，外界杂菌随空气水流人员进出进入养菌室
自然环境中，杂菌无处不在，广泛存在于空气、水和各种物质中，养菌室封闭不够严格，随通风气流、加湿水流，甚至人员进出时，附于人员衣物等地方，随人员进入。在养菌室中遇
适宜条件萌发，侵染原种菌袋。
【3】养菌室温度、湿度、通风等调节控制不到位，使杂菌滋生
香菇原种在养菌期，养菌室要保持23~27℃，空间相对湿度要保持在70:左右，同时要保证养菌室通风良好，有充足的氧气含量。如控制失误，形成益于杂菌萌发、发育、生长的高温高
湿环境，使杂菌滋生，就会造成对原种菌袋（瓶）侵染。
★预防办法：
【1】做好养菌室消毒灭菌
在香菇原种菌袋进入前，采用百菌清或绿霉净等灭菌药剂水溶液全面、无死角喷洒后，用硫磺过菇虫净气雾剂进行熏蒸灭菌，如是种植香菇时间过久的老菇棚，有必要甲醛加高锰酸钾
进行熏蒸，彻底灭杀养菌室杂菌。
【2】采取严格防护措施，杜绝媒介带菌进入养菌室
⑴门窗和通风通道安装过滤网，阻止杂菌进入。
⑵对加湿用水进行消毒灭菌后再使用。
⑶做好进出养菌室的人员管理，穿着经消毒灭菌的服装进入。
【3】调节好温度、湿度通风等环境因素
按香菇原种养菌要求调节温度、湿度和通风，协调好它们之间的关系，避免出现高温高、湿环境出现，抑制杂菌活力，避免杂菌侵染。
【4】喷洒灭菌药剂
养菌期间，养菌空间（地面、墙壁等）要定时喷洒灭菌，及时杀灭空间的存在的杂菌。
另外，母种带菌也是造成原种受到污染的途径之一，所以对所使用的母种要做好检测，拒绝使用带杂菌母种。
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