1.破损污染
(1)容器破损分装、灭菌、接种;运输、培养过程中,未轻拿、轻放造成机械破损。
(2)鼓气破损灭菌时急骤升温、升压或急骤降温;排气速度过快,使袋鼓气破损。
2.棉塞污染
(1)棉塞污染试管口沾有培养基或瓶(袋)口不干净或培养基与棉塞相接触。
(2)棉塞受潮灭菌时叠放不当,加水过多或灭菌灶砌制不合理或培养料湿度过高,棉塞吸潮而污染。
3.接种污染
(1)环境不洁净,接种室太大,不密封,接种室环境不清洁,消毒不严。
(2)消毒不严格接种箱不密闭,消毒不彻底或超净台接种前未按要求提前开机,接种工具及操作人员双手未消毒或消毒不严。
(3)无菌意识差未按无菌操作规范做,要求不严格。
4.毋种带菌
(1)检查不勤母种、原种培养过程中,未定期检查除杂,杂菌被菌丝覆盖而未被发现。
(2)工作不严转管或扩制母种随拿随用,未作仔细检查,而误用了已污染的菌种。
5.拌料污染
(1)拌料不匀拌料时培养料未充分拌匀,棉籽壳未充分预湿,夹带颗粒状或水分不足,造成部分偏干,形成灭菌死角。
(2)原料带菌拌料时使用了霉变、不新鲜原料,造成原料本身带有大量杂菌。
6.灭菌污染
(1)灭菌不彻底常压灭菌时间不足或湿度不够;高压灭菌未排除冷空气造成假压强或压力表失灵。
(2)叠放过紧装锅时叠放过紧,影响蒸汽穿透而产生死角。
(3)漏气严重由于灭菌锅漏气达不到所需要的温度。
7.培养污染
(1)环境潮湿培养室相对湿度过高,超过70%以上,有利于杂菌滋生以及棉塞吸潮而造成污染。
(2)棉塞过松棉塞做得过松,空气中杂菌乘虚而入。
(3)场地龌龊培养室不干净,空气中杂菌密度大,场地没有经常进行杀菌消毒。
(4)虫鼠危害老鼠啃咬棉塞或菌袋,并带入杂菌。或培养基内滋生螨、谷盗等虫害。