(1)培养基配方：
马铃薯、小麦、蔗糖、琼脂培养基:马铃薯200克,蔗糖20克,小麦20克,琼脂20克,水1000毫升。
(2)配置过程：
①培养基的制备。先将马铃薯洗净去皮,挖去芽眼,称取200克切成片,放入1000毫升水中煮,水沸后15分钟(以不煮烂为度)熄火,用4层纱布过滤;将小麦煮至熟而不烂,加入马铃薯滤液中,同时加入琼脂20克、蔗糖20克,补加水至1000毫升,边加热边搅动,别让琼脂粘锅底烧焦,也别让滤液沸腾冒出。待琼脂完全融化后,快速分装至各试管。培养基的分装量以试管的1/4为好,注意管口不能粘有残存的培养基,以免粘在棉塞上引起杂菌的污染。塞试管的棉塞不能塞得过紧过松,过紧不透气,菌种长不好,过松易脱落,也易污染杂菌。将灌好培养基塞好棉塞的试管,一捆捆扎好,包好牛皮纸后,垂直放入高压锅中灭菌。
②灭菌与摆斜面。灭菌锅中的水要加足,试管培养基入灭菌锅后,上面再盖2~3层牛皮纸,以防冷凝水弄湿了棉塞。旋紧高压锅旋钮,加热。当压力升至0.5公斤/cm2时,排净锅内全部空气,继续加热,当锅内的蒸汽压力达到1.0公斤/cm2之后开始计时,保压30分钟,灭菌结束。待指针降至零,开锅,取出试管,摆成斜面(摆斜面时,切忌将培养基粘上棉塞)。
(3)接种与培养：
在无菌接种箱内将菌盖边缘部分剪除,然后用70%挤的较干的酒精棉球作表面消毒,撕开种菇,用无菌的镊子夹取菌盖中心的菌肉2~3个(黄豆大小),在无菌操作下放入培养基内,塞上棉塞。接种完毕,将已接种的试管扎成捆,包好牛皮纸,写好菌种名称及接种年、月、日,然后放入25℃恒温箱培养。
这样加入麦粒的培养基菌丝旺盛,生长速度快,且污染率低。
