(1) 避免营养成分单一化
羊肚菌母种培养基最好采用黄豆芽、玉米粉、麦麸蔗糖、苹果汁等多种营养成分配成的综合培养基，不能单单使用PDA培养基，避免营养成分单一化。从许多单位试验明显表示，PDA培养基的母种菌丝日长速度比黄豆芽培养基慢2倍，而且菌丝长势细弱，菌丝干重量也相差1.2倍。
(2) C/N（碳氮比）要恰到好处
羊肚菌菌丝生长需要较高的氮源，一般菇类菌丝营养生长C/N以20:1为宜，生殖阶段30:1适于出菇。而羊肚菌菌丝营养生长阶段C/N以(20~25):1为宜。
(3) 添加剂必要性
培养基配方应添加磷酸二氢钾缓冲剂和硫酸镁调节剂，有效促进细胞代谢，尤其是用野生羊肚菌采收后的基部腐殖土制成悬浮液效果更佳。这种悬浮液含有适于羊肚菌菌丝生长的微量元素和刺激物。
推荐3种培养基配方：
1. 豆芽200克(煮汁)，葡萄糖20克，琼脂20克，硫酸镁0.3克，磷酸二氢钾1.5克，维生素B18克，水1000毫升，pH6.5。
2. 马铃薯200克，葡萄糖20克，硫酸铵2克，蛋白胨1克，硫酸镁1克，磷酸二氢钾1克，水1000毫升，pH6.5~7。
3. 马铃薯200克，葡萄糖20克，磷酸二氢钾、硫酸镁各0.3克，维生素B110克，水1000毫升，pH6-7。（《羊肚菌生物学基础、菌种分离制作与高产栽培术》贺新生著；《羊肚菌绿色高优栽培新技术》杨千登，林冬梨）
