1.设备问题
全国生产液体菌种设备的有多家，有些设备可操作性强，有的可操作性较差，一般用户技术不太熟练就容易造成失败。据我们多年的液体菌种指导的实践看，一套优 良的设备要有良好的空气过滤系统、灵敏的温度控制系统、快速冷却系统、停电保护装置，耐高压精加工的罐体等组成。空气过滤系统要有粗过滤器，气泵、总过滤 器、3~4级精过滤器组成。3~4级过滤器要能经得起高温高压，便于灭菌。呼吸器也要经得起高温和高压。温度控制系统要有温度控制仪表和传感器，要有相匹 配的电加热管或气源。冷却装置要做到快速冷却，进入下一级时温度降至28℃以下。
2.培养基问题
2.1食用菌培养基中营养物质的浓度及营养物质的浓度比例适宜时，食用菌才能良好管理生长。营养物质浓度过低不能满足食用菌正常生长的需要；营养浓度过 高，不但造成浪费，由于渗透压过大，还会对食用菌生长有抑制或杀伤作用。同样，培养基各种营养物质的比例关系是影响菌丝生长繁殖、代谢产物形成和积累的重 要因素。各种营养成分比例中最重要的是碳源及氮源的比例。即碳氮比，碳源不足菌体易衰老和自溶；氮源不足，菌丝会生长过慢，但碳氮比太小，食用菌会因氮源 过多易徒长，不利于代谢产物的积累。
2.2要有合适的碳源和氮源。要根据菌种调节适宜的PH值，还要有适宜的粘稠度。不同的菌种对碳源的种类要求及利用不一样，但大多数药用真菌都能利用葡萄 糖、麦芽糖，蔗糖和淀粉。如香菇最佳碳源是蔗糖和红薯淀粉。最佳氮源是酵母膏、豆饼粉，蛋白胨次之。香菇生长期最佳的氮源是复合氮源。其比例是：豆饼粉： 酵母膏：蛋白胨=1：1.5：0.2。
2.3不同的菌种适宜的PH值范围不同。通常调控PH有以下几种方法；①配制合适的培养基，调节培养初始PH至合适的范围，并使其有很好的缓冲能力。②培 养过程中加入非营养基质的酸碱调节剂如Caco2，或氨水或生理酸性物质。③将PH控制与代谢调节结合起来，通过补料来控制PH。
2.4培养基粘度越大，菌球越小，刺毛越短。但粘度不能过大。在培养过程中接种量越大，菌球越小，接种量大时通常可以分散的生长，而接种量小时，则有利于菌丝球形成。搅拌速度快、通气量大时菌球小，搅拌速度慢通气少时菌球直径大。
3.液体菌种的生长繁殖规律
食用菌液体菌种生长分为四个阶段，即缓滞期、指数生长期、稳定期、和衰亡期。
3.1缓滞期。其特点是，生长速率常数为等于零，菌体体积增长速度较快，胞内贮藏物质逐渐消耗，DNA和RNA的含量也相应提高，分裂迟缓，代谢活跃。在 这一时期细胞正在为下一阶段的快速生长与繁殖作生理与物质上的准备。缓滞期的长短因菌种、菌龄和培养条件不同而异。①接种龄，即接种物的生长年龄，它的生 长期状况处于生长期的哪一阶段。菌种处于指数生长期时，子代培养物质缓滞期短。处于缓滞期或衰亡期的子代培养物的缓滞期长。处于稳定生长期的培养物缓滞期 处于以上两者之间。②接种量，接种量的大小可明显影响缓滞期长短，接种量越大缓滞期越短。③培养基成分，营养丰富的缓滞期短，反之则长。
3.2指数生长期。液体的摇瓶种子被接入到发酵罐中，经一段时间适应，即进入指数生长期 。此期特点：生长速率最大，细胞分裂一次所需要的代时（G）较短，菌体大小形态生理特征比较一致，酶系活跃，代谢旺盛，活菌数与总菌数接近。
3.3稳定期。随着细胞的不断生长繁殖，培养基中营养物质的逐渐消耗，代谢产物形成，使细胞的生长速度逐渐下降，此时细胞的繁殖速度与死亡速度相等，即生 长速率常数为零。细胞的总数达到最高点。此时称为稳定生长期。此期特点是；活菌数稳定，总菌数达到最高水平，以代谢产物质合成与积累为主，代谢积累达到最 高值。
3.4衰亡期。达到稳定生长期的菌群，由于营养物质的短缺，群体中的细胞死亡率逐渐上升，以致死亡菌数超过新生菌数，群体中的活菌数下降，出现了“负生长”曲线下跌。此期特点：菌体细胞形状和大小出现异常，甚至畸形，菌体发生自溶。
