一、液体菌种生产的关键技术
1.溶氧量
液体菌种生产中最关键的是培养液中氧的溶解量，因为在菌丝生长过程中，必须不断的吸收溶解其中的氧气来维持自身的新陈代谢，氧气在液体（水）中的溶解量与压力、温度有关，同时与培养液的接触面积、渗透压有很大的关系。
2.空气过滤
技术的关键就是保证进入的空气无菌度高，因此必须选择孔径小、材料先进的过滤膜。一般细菌直径在0.55um,酵母菌在110um，病毒一般在20400mu，所以选择过滤膜时应综合考虑以上因素。当然如果选的太小，成本将大幅度提高。另外环境对于空气影响很大,在空气压缩机房、制种车间必须保持环境清洁。
3.培养液
培养液是菌丝生长发育的营养源，要求营养全面均衡。不同的菌种对营养要求偏重不同。配制原料有糖、麸皮、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素、蛋白胨、土豆汁、酵母浸膏等。配置培养液时，先将土豆片、麸皮一起煮熟，将汁液滤出，后加入其它辅料混匀即可。
4.接种
培养器上端有接种口，也是装料口，将母种并瓶后加入抑菌剂，而后必须在火焰圈的保护下倒入罐体内，要求动作快、操作准确。
5.环境
环境对菌种生产影响很大，过滤器本身不可能把杂菌百分之百地滤掉，减少环境中的杂菌基数是非常重要的，液体菌种母种接入到经灭菌的培养液中只要能形成对杂菌的生长优势就可以抑制杂菌感染，也就是说，液体菌种培养不是建立在绝对无菌的前提下相反是建立在相对无菌的前提下。就此意义上说，保持环境清洁，减少空气中杂菌基数，对于提高菌种培养成功率意义较大。
二、液体菌种生产流程
工艺流程图：
空气压缩→过滤
↓
配料→装罐→灭菌→冷却→接种→培养→液体种
↑
试管斜面种→ 三角瓶液体专用母种
1.试管种的生产：液体菌种对试管的纯度要求很高。生产前,先要将试管种进行纯化,不然很难生产出液体种。纯化的方法有二种：固体种生产法和菌种提纯法。二者可任选其一。
2.三角瓶液体菌种专用母种生产：专用母种分固体和液体两种。从生产技术上看，液体专用母种要难一些，是用电磁搅拌器进行生产。整个过程要7天时间，生产的液体种稍经加工就可以直接使用。固体种生产时间要长些，保存的时间也长，而且方便运输。二者的接种效果都是一样的。
3.发酵罐生产
生产时要先进行培养料的配制。配料时先将土豆去皮切片，与麸皮混合后用不锈钢锅煮熟并取汁，再将辅料KH2PO4、MgSO4等溶入，混匀后装入罐中加热，至125℃并维持40分钟左右进行灭菌，灭菌结束后用冷水冷却至培养温度，而后将并瓶后的三角瓶种接上进行培养，培养时根据不同的菌种，设定适宜的温度。
培养期间应注意观察，并做好记录。包括温度、压力、气流量、排出气体的气味等。如遇到停电，排气阀自动关闭或人工关闭来保持罐中处于正压状态。来电后重新启动，并打开排气阀继续培养。培养过程中，可随时无菌操作采样分析，几天后待菌球密度合适（从视镜观察）即可接种。
