姬松茸菌种也分母种、原种、栽培种三级。
(1)母种
一般采用pda培养基(去皮马铃薯200克、葡萄糖20克、琼脂18～20克、水1000毫升)。制作方法：称取去皮马铃薯200克，洗净，切成不规则的、大小为1～2厘米的块，煮沸后再烧15分钟，以马铃薯酥而不烂为度。用4层纱布过滤，取滤液，放入18克琼脂，加热至琼脂完全熔化，再用4层纱布过滤。在滤液中加入葡萄糖20克，充分搅拌，加热熔化，趁热分装试管，分装量约为试管容量的1/5。然后塞上棉塞，于每平方厘米1.1公斤压力下灭菌30分钟，出锅后，稍事冷却，趁热摆斜面。用从可靠菌种提供处所获优良母种在无菌条件下扩接，一支试管种可扩接30支左右。适温培养，7～10天长满斜面。
(2)原种
一般采用木屑米糠培养基(木屑77.5%、米糠20%、糖1%、石膏1%、石灰0.5%，另加水120%～130%)。制作方法：先将食糖溶于少量水中，将木屑、米糠、石膏、石灰按比例称好，拌和均匀，把糖水加入清水中，倒入木屑料内，边加边拌，充分拌匀，然后装瓶，清洁瓶口和外部，塞棉塞，每平方厘米1.5公斤压力灭菌2小时。选长势良好、无污染母种，每管可扩接4～6瓶，严格按无菌要求操作。适温培养，3～4周，菌丝长满全瓶。
(3)栽培种
一般采用谷粒培养基(小麦、黑麦、高粱、小米等均可作为谷粒)。制作方法：先将谷粒去除瘪粒、杂质，淘洗干净，取谷粒12公斤，加水17公斤，煮沸15分钟，于沸水中浸15分钟，滤掉水分，稍晾干。取谷粒(熟)11公斤，加石膏粉120克，碳酸钙粉40克，拌匀后装瓶，于每平方厘米1.5公斤压力下灭菌2小时。选长势良好，无污染原种扩接，严格按无菌要求操作。适温培养，3～4周菌丝长满全瓶。
