平菇是一种适应性广、抗逆性强、生产周期短、生物转化率高的食用菌。平菇菌丝虽然具有生长速度快,并且抗杂菌能力强的优点,但平菇菌丝在不良条件下发菌生长,菌丝活力更容易衰退,以致菌丝更容易带毒带菌,所以对于平菇的菌种提纯复壮尤为重要,由于平菇栽培和制种简单,多数菇农自制平菇菌种,保藏母种,特别对一些相对有经验的部分菇农,认为平菇栽培容易,制种简单,使用保藏不好的母种,盲目转接母种试管,或者多代繁殖,或不正确的进行营养繁殖,加上培养基配置比例不当以及发菌条件的不足等因素,使得菌种种性产生变异,菌丝生活力衰退,使用这样的菌种,将给生产造成很大损失。为此,我们在平菇生产实践中,提出要及时提纯复壮菌种,提纯复壮菌种的方法主要有孢子有性繁殖法,子实体组织培养法和先端菌丝更新法。下面把这三种方法做一下简单介绍,主要提倡在生产上推广先端菌丝培养法。
第一种方法,利用孢子进行有性繁殖,主要程序有选择典型的具有本品种特点的子实体,清洁消毒收集孢子,稀释孢子接种,培养孢子菌落,挑选菌落,扩大培养,留存并再进行出菇实验,生产检验推广。本方法优点脱毒彻底,复壮效果明显,并且可以发现由变异产生新特菌株。所以本方法多在科研上应用,是专业研究工作者常用方法。本品种的缺点是操作比较繁琐,菌落中容易产生变异的菌株,如果选择不当,原来菌株的性状随之改变,所以不是专业人员慎重采用。
第二种方法,组织培养法,利用典型症状的平菇子实体,将子实体的组织接种到PDA培养基上,经过挑选菌落菌丝,然后扩大培养,实验出菇后用于生产。本方法是有经验的菇农常采用的方法,也是专业菌种生产部门常采用的菌种复壮法,其优点是操作相对简单,菌种种性保持较好,品种性状稳定,缺点是脱毒和更新效果不很明显,为此我们在生产上结合以下叙述的先端菌丝培养方法,复壮和更新平菇菌丝,提高了菌株的活性,显著提高了平菇产量。
第三种方法,先端菌丝培养法,在母种培养阶段,对于长期保藏的母种和疑似衰退的母管,在培养基的配比和选择上,在菌丝的挑选和培养上,采用适当的措施,经过筛选和变更培养基,最后生产出复壮的平菇菌种。
首先第一步,配置不同类型的培养基,目的是在不同培养条件下驯化培养和观察菌丝的生长情况,进而不断挑取先端菌丝,最终培养出复壮的平菇菌丝。常用的更新复壮培养基有
(1)普通PDA培养基
马铃薯200克﹢葡萄糖20克﹢琼脂15~20克+水1000毫升,PH自然。
(2)高梁培养基
高粱面30克﹢琼脂10克﹢水1000毫升
(3)玉米培养基
玉米面30克﹢蔗糖20克﹢琼脂15克﹢平菇煮水1000毫升(20克鲜菇)
(4)加富PDA培养基
马铃薯200克﹢葡萄糖20克﹢琼脂20克﹢磷酸二氢钾3克﹢硫酸镁1.5克﹢蛋白胨5克﹢玉米粉10克﹢酵母膏5克﹢小麦煮水1000毫升(100粒即可)。
(5)棉皮适应驯化PDA培养基
80克棉皮﹢200克土豆﹢20克葡萄糖﹢15-20克琼脂﹢4片食母生+3克磷酸二氢钾+1片VB﹢水1000毫升,
第二步,挑取先端菌丝,在不同培养基上培养。
在无菌条件下,先用普通PDA培养基,用接种耙把培养基斜面最前端较薄的培养基断开约1厘米,把待接母种接在试管中间培养基上,置于15-25℃下培养,当菌丝长到断开处时,则会继续伸长,穿越断开处,伸入前端的小块培养基上,经过断裂又伸长,菌丝显得格外粗壮、有力时转接,挑取小块培养基最前端的一块组织,放在高梁平菇培养基上,继续培养,在高粱培养基上菌丝可能生长较为稀疏,一般在接种3-4天后,挑取先端菌丝转接玉米平菇培养基上,继续培养,一般在接种3-4天后,挑取先端菌丝转接加富PDA培养基上,在加富PDA培养基上菌丝长得比较快,菌丝粗壮,然后再在棉皮适应驯化PDA培养基上继续培养,经过4-5次先端菌丝的挑取培养,基本上可以达到去毒复壮的目的。注意挑取培养的培养基试管数量不少于10支,以便从中筛选。
这种方法可以在生产上较快培养复壮的生产用种。进而能逐步提高菌种各方面的性状,使发菌加快,抗逆抗杂性增强,质量明显提高。