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食用菌育种 | 野生香菇:菌种分离操作步骤

时间 : 05-08 投稿人 : 同浩 点击 :

野生香菇是可以分离出菌种的,但分离出的菌种是不是能够成活,能够成活,是否在人工种植中能够适应人工模拟的生长环境,也具有着不确定性。如果要它成为人工种植中能使用、并且具有优良的抗性、出菇性能、产量性能、质量性能还需进行无数次的驯化,驯化成功才能被作为新品种进行推广使用。

野生香菇:菌种分离操作步骤 | 菌菇种植

对野生香菇进行分离并不难,其中最容易的就是采用组织分离法。所谓的组织分离法,简单的说就是利用香菇组织能再生菌丝的特性,取一块香菇的新鲜组织,放进装有培养基的试管中,再把试管放置在适于香菇菌丝体生长的恒温环境中,进行菌种培育,详细操作步骤如下。

一、PAD培养基制作

用组织分离法制作菌种,必须先制作好PDA培养基备用。

1. 所用原料

马铃薯200克、葡萄糖20克、琼脂15克、水1000毫升。

2. 制作

马铃薯洗净去皮,切成小颗粒,放入铝锅中,加入1000毫升水,进行蒸煮至沸腾。沸腾状态下保持30分钟后,关火。用三层以上纱布对锅中的马铃薯进行过滤,把经过过滤得到的马铃薯溶液倒入量杯中。

接着,把葡萄糖、琼脂放入量杯中,并把量杯中的水补足1000毫升后,进行搅拌均匀,使葡萄糖和琼脂充分溶解。如溶液温度过低,不能充分溶解,可对量杯进行加热,直至全部溶解。

3. 灌装试管

就是把调节好的培养基趁热用漏斗灌装进早就准备好的试管中,灌装量是试管容积的1/5~1/4,灌装完毕,试管盖紧胶塞,每7支为一组为一组进行捆扎。

4. 灭菌

把试管放进高压灭菌锅中进行灭菌。灭菌温度121℃、压力0.105Mpa,灭菌时长30分钟,灭菌过程中,要注意排净高压灭菌锅中的冷气。灭菌后,锅内温度降至80℃时,放净锅中蒸汽,取出试管。

5. 摆放试管斜面。

灭菌锅中取出的试管放置在平台上,试管开口端用物垫起,让试管内培养基形成斜面,使试管内培养基最高处处于试管的1/2位置,试管上覆盖毛巾或棉垫类物品,避免试管内出现冷凝水。试管中的培养基凝固,试管斜面培养基制作完成。

6. 杂菌测试。

把制作好的培养基试管,放入25℃的恒温箱内,48小时后,显微镜检测,培养基上无杂菌生长,低温保存培养基试管待用。

二、分离香菇组织

取下新鲜野生香菇的一块组织,组织摘取要在无菌条件下进行。

1. 消毒灭菌

用75%酒精对整个香菇菇体表面进行擦拭后,拿入经消毒灭菌的接种箱,并再次用75%酒精进行表面擦拭后,点燃酒精灯,把香菇菇体一撕为二,把手术刀在酒精灯上进行火焰消毒冷却,然后切下香菇组织。

2. 摘取

用于菌种培养的香菇组织摘取,一般摘取位置选择在菌柄和菌褶交汇处,此处组织的细胞再生能力最强。组织大小,取下组织块的大小近于绿豆粒大小即可,摘取完毕,放入试的培养基上。为了成功率,一般一次培养数量,至少在7支试管以上。

3. 培养

把装有香菇组织的培养基试管,放进恒温箱内,温度调节在25℃左右。1周左右,如果香菇组织表面,长出绒毛状菌丝,即视为成活。如组织表面没有任何变化,表明分离失败,只能重新进行分离。

在恒温箱中,对成活的菌丝再培养2周左右,进行一次转管,如转管后菌丝成活,就是得到了野生香菇的母种。

得到野生香菇母种后,要进行进一步的筛选,留出菌丝生长最为强壮的母种,进行原种种扩繁后,进行栽培实验和人工驯化,人工驯化获得成功后,证明一个新的香菇品种诞生,即可以进行扩繁原种、栽培种,进行栽培。如进行推广,需到相关部门注册、办理资质,才可进行。

野生香菇的菌种分离,说起来容易,成活应该问题不大,最主要在分离后的人工驯化,能够驯化成功,才能成为真正的菌种。经历驯化过程时,要做好所有的心里准备,辛苦不必提及,最主要是要有接受失败的勇气,不气馁、不灰心,不达目的不罢休的坚定信心。(初始农人)

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