液体制种检验和判断菌种纯度与质量是一项重要指标。以往检验液体菌种质量通常以感观方法,即看、闻、旋来决定菌种质量,大多数人往往由于经验不足难以把握指标,常出现判断困难和失误,给生产带来影响和损失。为解决上述问题,除正确按照生产工艺流程操作外,采取一种快速有效检验方法,早期及时检验液体菌种质量,对保障生产顺利进行至关重要。我们经过多年探索实验和生产实践检验,总结了一种早期及时有效的液体菌种检验方法,简单易行,现将这种方法介绍如下:
1、检验材料
1.1 土豆200g、葡萄糖20g、琼脂18-20g、蛋白胨5g、水1000ml。将土豆洗净切片加水1000ml,煮沸后10-15min用纱布过滤,取滤液1000ml,加琼脂溶化后加葡萄糖、蛋白胨分装试管内,每管装20ml,塞棉塞,包牛皮纸,高压灭菌121℃-123℃,维持30min,自然降压到零时,打开锅盖,摆成斜面,制作成试管斜面培养基备用。
1.2 用250ml三角烧瓶或20×200mm空试管,打好棉塞,包上牛皮纸放入高压锅内灭菌,121℃灭菌30min,冷却后备用。
1.3 如果不制作试管斜面培养基,可将每次灭好的菌袋或瓶预留出一筐(12个)备用。
2、检验方法
2.1 取样
液体菌种检验可分二次进行,第一次在培养24h—36h时取样,第二次在第培养36h—48h时取样。
用酒精棉火焰将接种阀灼烧,在火焰保护下接入灭好的三角瓶内或试管中,塞上棉塞,放入接种室。
2.2 接种
接种室按常规方法消毒后,打开接种机,点燃酒精灯,在酒精灯火焰保护下将取样的液体菌种,用接种钩挑取菌球或菌液接入试管斜面培养基上,塞上棉塞。
如果没有制作或不具备试管斜面培养基,可以用灭好菌的栽培袋或菌种瓶,按前法在接种阀处直接取样接袋或瓶,放入培养室培养。
2.3 培养
放入培养室或恒温培养箱内进行培养,温度为28℃—32℃。
2.4 观察
于培养的24h—36h之间前后观察两次。如菌球萌发变洁白,接种面无红、黄、绿、黑色杂菌,证明液体菌种生长正常,液体菌种生长成熟,后即可使用接种;否则,菌球萌发不洁白,接种面出现红、黄、绿、黑色杂菌菌落,说明液体菌种已污染杂菌。
3、总结
通过此法检验能在早期判断及时准确有效地掌握液体菌种培养状态,检验液体菌种质量即简便、又快捷,对指导液体菌种的生产应用起到了保障作用,以免盲目接种到大批量栽培袋或菌种瓶中,给生产造成不必要的损失。(刘永昶 刘永宝 王德林 刘敏)