保证食用菌菌种的贮藏质量可有效保持其优良种性,延长优良品种使用的年限。因此,它与新品种的选育具有同等的重要性,是食用菌生产中的一项必不可少的重要环节。但正规、严格的贮藏方法需要一些设备,对操作技术也有很高要求,对许多的菇农来说,一些简单的土办法更可行,更有推广价值。
1.井底低温贮藏。是利用井底具恒温且温度低的原理进行菌种贮藏的方法,适用于不具备保鲜冰箱的菇农。将要保藏的试管母种,用无菌橡皮塞蘸石蜡封口,装入密闭的广口瓶或塑料袋中扎紧,沉人井底贮藏,可贮藏2~5个月。
2.石蜡封口贮藏。把蜡纸裁成6~8厘米见方,放入75%酒精中浸泡1分钟。将已培养好试管种的管口在酒精灯火焰上方旋转灭菌后,用镊子取出蜡纸,扎紧管口。再将包好蜡纸的管口浸入熔化的石蜡中.将蜡纸完全浸入为止,使蜡纸紧紧封包在管壁上,绝不漏气。待石蜡冷却凝固后,置冰箱或室温下保存。
用石蜡封口后的菌种能有效保持培养基水分,提高管内二氧化碳浓度,避免杂菌污染,转管后菌丝恢复生长快。在室温条件下贮藏6个月,培养基还未见干缩,菌丝仍有较强生命力;在0~4℃条件下保存12个月后菌丝体外观正常,无老化现象,转管成活率高。
3.玻璃纸封口贮藏。用明胶15克(粘合剂)、硫酸铜2克、美蓝1~2滴(指示剂),溶于100毫升热水中,配制成封口剂。将新长满的母种拔去棉塞,管口朝下,蘸上封口剂,贴上用95%酒精浸泡过的玻璃纸(赛珞璐),再用石蜡熔封。在室温下,菌种至少可贮存8个月,并能防止霉菌或螨的侵染。在斜面注入无菌矿油(液体石蜡),可大大延长贮藏时间。
4.厩肥贮藏。此法适合贮藏双孢菇等草腐菌类。将腐熟牛粪等堆肥晒干、打碎,取300克干堆肥,用5毫米孔径筛过筛,加1000毫升水调湿,装入试管,占管深1/3~1/2,在0.15兆帕压力下灭菌2小时。确认无菌后接种,菌丝长满后,放在3℃冰箱内贮藏,每隔2年移植一次。在长期贮藏中,如培养基失水,应将贮藏菌种及时接种在琼脂斜面上进行活化,再继续贮存。此法连续贮藏4年后,其生产性状未出现明显变化。
5.麸皮贮藏法。称取一定量的麸皮加水或营养液后拌匀即可使用。水、麸皮装入试管,高压灭菌后接入菌种,放在适温下培养。菌丝体发育好后,将试管放入干燥室在室温下进行干燥。干燥后放在20℃以下干燥处贮藏,可贮藏3~5年时间。
6.生理盐水贮藏法。将菌种接入马铃薯培养液中,每250毫升三角瓶装60毫升培养液,振荡培养或每天摇动5~10次,培养5~7天,然后将形成的菌丝球移入装有5毫升无菌生理盐水的试管中,每管约移入4~5个菌丝球,塞上棉塞,用蜡封好口,置低温下,可贮藏1年。
7.麦粒贮藏法。取优质小麦,淘洗后浸入20℃水中泡5小时,稍加晾干,装管,装入量为管长的1/4到1/3为宜,灭菌,趁热播散,冷却后接人菌丝体,适温培养至大多数麦粒上出现稀疏菌丝时终止培养。置于25℃以下干燥处,可贮藏1~2年。